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纳米粒的制bei

Posted at — Sep 12, 2021

15.33 Ceria Nanoparticles that can Protect against Ischemic Strokey

英文名 |浓度|厂家|中文名 –|–|–|– Cerium acetate |(98%), |醋酸铈 xylene |(98.5%+), |二甲苯 hydrogen peroxide |(H2O2, 30%), |过氧化氢 and rhodamine B isothiocyanate (RITC) ||were purchased from Sigma-Aldrich Inc (St. Louis, MO, USA). | Oleylamine| (approximate C18-content of 80–90%) |was purchased from Acros Organics (Geel, Belgium). n-Hexane (99%), |油胺 ethanol |(99%), |正己烷 chloroform |(99%), |乙醇 acetone (99%) ||were purchased from Samchun Chemicals. |氯仿 1,2-Distearoyl-sn-glycero-3- phosphoethanolamine-N-methoxy(polyethylene glycol)-2000 | 1,2- distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-amino|(polyethylene glycol)-2000 ||were purchased from Avanti Polar Lipids Inc (AL, USA). | SOD assay kit ||was purchased from Dojindo Laboratories (Japan) | amplex® red hydrogen peroxide/peroxidase assay kit ||was purchased from Molecular Probes Inc (Eugene, OR, USA).|

二氧化铈纳米粒子的合成

  1. 将 1 毫摩尔(0.43 克)醋酸铈 (III)(98%,Sigma-Aldrich)和 12 毫摩尔(3.25 克)油胺(C18 含量约为 80-90%,Acros Organics)添加到 15 mL 二甲苯中( 98.5%,西格玛奥德里奇)
  2. 所得溶液在室温下搅拌2小时,然后在真空下加热至90℃。
  3. 在90℃剧烈搅拌下,向溶液中注入1毫升去离子水,溶液颜色变为灰白色,表明发生了反应。
  4. 所得混合物在90℃下老化3小时,得到浅黄色胶体溶液,然后将其冷却至室温。

ps:老化是指沉淀反应终了之后,沉淀物与溶液在一定的条件下还要接触一段时间,在这段时间里,沉淀的性质虽时间而变,主要发生颗粒长大,晶型完善,凝胶脱水收缩等现象,

  1. 将乙醇(100mL)加入到沉淀的二氧化铈纳米颗粒中。
  2. 沉淀物用乙醇和丙酮离心洗涤,所得二氧化铈纳米颗粒易于分散在有机溶剂中,如正己烷和氯仿。
  3. 对于大规模合成,我们将这些试剂的体积增加了 10 倍。

磷脂-PEG 封端的氧化铈纳米粒子的合成(Synthesis of phospholipid-PEG-capped ceria nanoparticles)

  1. 为了制造生物相容性氧化铈纳米粒子,分散在氯仿中的氧化铈纳米粒子被聚乙二醇磷脂壳包裹。
  2. 首先,将 5 mL含有(ceria nanoparticle)氧化铈纳米颗粒的CHCl3 (10 mg/mL)与含有 50 mg mPEG-2000 PE 的 5 mL CHCl3 溶液混合。
  3. 然后,通过旋转蒸发仪蒸发溶剂,并在 80°C 下真空孵育 1 h
  4. 加入 5 mL 水得到澄清的淡黄色悬浮液。
  5. 过滤后,使用超速离心去除过量的 mPEG-2000 PE。
  6. 将纯化的磷脂-PEG 封端的氧化铈纳米粒子分散在蒸馏水中。

RITC 共轭氧化铈纳米粒

  1. 首先,分散在氯仿中的氧化铈纳米颗粒被胺官能化的 PEG 脂质和 PEG-磷脂壳包裹。
  2. 将 5 毫升含义二氧化铈纳米颗粒的CHCl3 (10 mg/mL) 与含有 45 mg mPEG-2000 PE 和 5 mg DSPE-PEG(2000) 胺的 5 mL CHCl3 溶液混合
  3. 蒸发溶剂并随后过滤后,氧化铈纳米颗粒分散在水中
  4. 胺基团可用于连接 RITC 分子。
  5. 加入 5 毫克 RITC,并将溶液搅拌 6 小时
  6. 超速离心后,将 RITC 结合的二氧化铈纳米颗粒分散在蒸馏水中。

14.91 表面结合的活性氧产生用于选择性抗菌作用的纳米酶(Surface-bound reactive oxygen species generating nanozymes for selective antibacterial action)

银纳米颗粒、银纳米立方体和银钯纳米笼的制备。p11

以柠檬酸盐为表面活性剂,抗坏血酸为还原剂,合成了银纳米粒子。

  1. 通常,在 100 mL 烧瓶中,通过缓慢加入 0.1 mol/L NaOH 溶液将含有柠檬酸三钠 (3.0 × 10−3 M) 和抗坏血酸 (6.0 × 10−4 M) 的 40.0 mL 水溶液调节至 pH 值 11
  2. 将0.4 mL AgNO3 水溶液(0.1 M)加入烧瓶中,搅拌速度为1000 rpm,35 ℃水浴。)
  3. 颜色马上变深棕。十五分钟后
  4. 用冷水流几分钟终止反应。
  5. 最后,将银纳米颗粒离心(850 × g 下 10 分钟)并用去离子水洗涤数次以去除多余的表面活性剂和杂质。

Ag 纳米立方体是通过以下程序合成的,根据之前的协议稍作修改

  1. 在典型的合成中,将 20 mL 乙二醇 (EG) 添加到 50 mL 圆底烧瓶中,并在油浴中在磁力搅拌下加热至 150 °C 1小时。
  2. 首先将氢硫化钠 (NaHS) (3 mM, 0.24 mL) 注入加热的溶液中,4 分钟后,加入 HCl 溶液 (3.5 mM, 2 mL),然后加入聚(乙烯基吡咯烷酮)(PVP,20毫克/毫升,5 毫升,MW = 55,000)。
  3. 再过 2 分钟后,将三氟乙酸银(CF3COOAg,282 mM,1.6 mL)快速加入混合物中
  4. 所有试剂均在乙二醇中新鲜制备。
  5. 通过改变反应时间和监测紫外可见分光光度计测量的 LSPR 峰位置可以很好地控制 Ag 纳米立方体的边长
  6. 一段时间后,通过在不停止搅拌的情况下将其浸泡在冰水浴中来使溶液骤冷。
  7. 最后,收集所得样品并通过离心用乙醇和去离子水纯化数次,然后重新分散在去离子水中以备进一步使用。

AgPd 纳米笼是通过 Ag 纳米立方体和氯钯酸钾 (K2PdCl4) 之间的电置换反应过程合成的。

  1. 在磁力搅拌下,在与回流冷凝器相连的 50 mL 圆底烧瓶中将含有 200 mg PVP 的去离子水 (20 mL) 加热至 90 °C。
  2. 将Ag纳米立方体的水溶液(1mg/mL,0.5mL)加入烧瓶中,10分钟后,使用注射泵以0.4mL/min的速率将K2PdCl4(0.5mM)缓慢滴入溶液中。
  3. AgPd中空纳米结构的不同摩尔比与K2PdCl4的体积和浓度以及滴速有关。
  4. 将烧瓶置于冰水浴中终止反应,并在整个过程中保持搅拌。
  5. 将少量固体 KCl 撒入溶液中,直到 AgCl 溶解并随着 Cl- 的过饱和而去除,这有助于产生明确定义的纳米笼中空结构。
  6. 所得溶液通过离心用去离子水洗涤五次,然后重新分散在去离子水中以备进一步使用。

热还原二氧化钛纳米粒子(R-TiO2)的制备

  1. R-TiO2 是按照先前报道的协议 54,55 制备的,并稍作修改
  2. 简而言之,将多晶 TiO2 纳米颗粒(Degussa P25)粉末(10 毫克)在真空下缓慢加热(约 5 小时)至最高温度 500 °C,并在 500 °C 下保持 1 小时。
  3. 然后将还原后的粉末自然冷却至室温,然后暴露于过量的空气中,从而产生预期的 R-TiO2。

Ce6/PLGA 或 Ver/PLGA 纳米颗粒的制备

  1. PLGA40k-PEG2k 纳米颗粒预装了 Chlorin e6 (Ce6)(即 Ce6/PLGA)或 verteporfin (Ver)(ieVer/PLGA)通过纳米沉淀工艺制备2
  2. 简而言之,向 PLGA40k-PEG2k 溶液(1 mL,3 mg/mL 的丙酮溶液)中加入 Ce6 或 Ver(1 mL,0.15 mg/mL 的丙酮溶液)溶液。
  3. 将所得混合物逐滴加入无菌 Millipore 水 (3 mL) 中,然后在露天搅拌 (300 rpm) 24 小时以蒸发丙酮,得到预期的 Ce6/PLGA 或 Ver/ PLGA 纳米颗粒

聚乙二醇化脂质体的制备

  1. DOPC原液与DSPEPEG2k原液以DOPC:DSPE-PEG2k=90:10的质量比混合;所有脂质储备溶液的氯仿浓度均为 20 mg/g
  2. 将所得混合物在温和的氮气流下干燥成薄膜,并在真空下干燥过夜。将所得薄膜在 40°C 下用 Millipore 水再水化 2 小时至最终脂质浓度为 10 mg/mL。
  3. 所得的脂质分散体经过七次冻融循环,随后使用微型挤出机(Avanti Polar Lipids)通过孔径为 0.2 μm(Whatman)的核孔膜挤出 13 次,得到预期的聚乙二醇化脂质体。所有脂质分散体在使用前均储存在 4°C。

Ce6/PLGA@lipid 或 Ver/PLGA@lipid 纳米颗粒的制备

  1. 通过超声处理 Ce6/PLGA 或 Ver/PLGA 和脂质体的混合物(DOPC:DSPEPEG2k = 90:10)(脂质与 PLGA 的质量比 = 1:1),用脂质双层包覆 Ce6/PLGA 或 Ver/PLGA 纳米颗粒) 在浴式超声仪 (KUDOS, SK5210HP) 中以 53 kHz 的频率和 100 W 的输出功率持续 5 分钟,然后在 10,000 × g 下离心(5417R,Eppendorf)10 分钟以去除多余的脂质体,得到作为-预期的脂质双层涂层纳米颗粒(即,Ce6/PLGA@lipid 或 Ver/PLGA@lipid)。

AgPd0.38@lipid 纳米颗粒的制备

  1. 用脂质双层涂覆 AgPd0.38 是通过在浴式超声波仪中对 AgPd0.38 和脂质体的混合物(DOPC:DSPE-PEG2k = 90:10)(脂质与 AgPd0.38 的质量比 = 1:1)进行超声处理来完成的( KUDOS, SK5210HP) 在 53 kHz 的频率和 100 W 的输出功率下持续 5 分钟,然后以 8000 × g 离心(5417R,Eppendorf)10 分钟以去除多余的脂质体,从而产生预期的脂质双层涂层AgPd0.38

AgPd0.38@P纳米粒子的制备

  1. 用血小板膜涂覆 AgPd0.38 是通过在浴式超声仪 (KUDOS, SK5210HP) 中以 53 kHz 的频率超声处理 AgPd0.38 和血小板膜囊泡的混合物(脂质与 AgPd0.38 的质量比 = 1:1)来完成的和 100 W 输出功率 5 分钟,然后以 8000 × g 离心(5417R,Eppendorf)10 分钟以去除多余的血小板膜,得到预期的血小板膜包被的 AgPd0.38